引言
无季节性的猪流感病毒(SIV)结合感染猪作为“孵化器”的作用,在乡村集市持续感染人类的pH1N1重组流感病毒H3N2,强调流感病毒监测的重要性是为了积极应对潜在的猪流感大流行。迄今为止,全球几乎没有做SIV的积极监测,是因为鼻拭子样本的检测周期很短。因此,需要更加敏感和可靠的方法来监测流感病的变异。
材料与方法
qRT-PCR中用M基因作为靶基因进行RT-PCR。简单说,MagMAX Pathogen RNA/DNA kit (Life Technologies公司)扩增:Vetmax Gold SIV detection kit (Life Technologies公司)。使用Light Cycler 480 Real-time PCR 系统(罗氏)。用鸡胚分离病毒(ECE),Madin-Darby犬肾细胞(MDCK)根据之前描述的操作进行(OIE Terrestrial Manual 2008)。
结果
图1 sw/Gent/28/10 (H1N1)从接种猪的鼻拭子样本和唾液样本中的阳性检出率
用qRT-PCR监测SIV较长一段时间,在唾液样本中有较高的检出率。尤其值得注意的是,在接种后21天检测唾液样本中猪流感病毒的可能性在25%,尽管所有鼻拭子样本在接种后7天已呈阴性。
尽管在鼻拭子和唾液样本中有大量的SIV,当ECE和MDCK细胞比较鼻拭子和唾液样本检测SIV的能力,从唾液检测病毒的方法是很罕见的。
结论与讨论
本文数据显示,用绳子搜集猪唾液样本可用作临床诊断,较鼻拭子能更长时间监测SIV RNA。然而,需要进一步的研究来评估病毒亚型的影响和接种剂量对检测的影响。从唾液样本中分离病毒很难,要克服
这些困难,我们必须更深入地研究。