假母猪
 

　　①在假母猪后部涂洒发情旺盛的母猪尿液或母猪副性腺分泌物，被调教的公猪来到假母猪跟前嗅到特殊气味.诱发公猪性欲而爬跨。如几次不成，可反复训练，即能成功。
 

　　②在假母猪旁边放一头发情母猪.诱发公猪的性欲;爬跨后不让交配而把公猪拉下，爬上去，拉下来，反复多次，当公猪性欲冲动至高峰时，迅速牵走或用木板隔开发情母猪，引导公猪直接爬跨假母猪采集精液，经过儿次反复训练，即可成功。
 

　　③将待调教的公猪拴系在假母猪附近，让其日睹另一头已调教好的公猪爬跨假母猪，引起冲动，然后诱使其爬跨假母猪，便可进行采精总之，调教公猪要有耐心，反复训练，切不可操之过急，忌强迫、抽打、恐l 遗下。
 

　　( 2 )物品准备：应准备好集精杯，以及镜检、稀释所需的各种物品。若采用重复使用的器材，在每次使用前应彻底冲洗消毒，然后放人高温干燥箱内消毒
 

　　( 3 )采精人员的准备：采精人员的指甲必须剪短磨光，充分洗手消毒，用消毒毛巾擦于，然后用75 %的酒精消毒，待酒精挥发后即可进行操作。
 

　　2 .采精方法理想的采精方法应具备：
 

　　①全部收集一次射出的精液;
 

　　②不影响精液品质;
 

　　③不损伤公猪生殖器官和功能;
 

　　④器械简单，力法可行。目前生产上常用的采精方一法有两种，即手握法和假阴道法。
 

　　( l )手握法：该法是目前广泛使用的一种采集方法。具有设备简单、操作方便等优点，缺点是精液容易污染和受冷打击采精时术者左手戴卜消毒的乳胶手套，蹲在假母猪左侧，待公猪爬跨假母猪后，用l %高锰酸钾溶液将公猪包皮附近洗净消毒，用生理盐水冲洗然后左手握成空拳，手心向下，于公猪阴茎伸出同时导入空拳内，立即紧紧握住阴茎头部，不让来回抽动，使龟头微露于拳心之外;手指由轻到紧带弹性有节奏地压迫阴茎，摩擦龟头部，激发公猪的性欲，公猪的阴茎开始作螺旋式的仲缩抽送，做到既不滑掉，又不握得过紧，满足猪的交配感要求，直到公猪的阴茎向外伸展开始射精。射精时拳心有节奏收缩，并用小拇指刺激阴茎，使射精充分。
 

　　右手持带有过滤纱布的保温采精瓶收集精液。公猪排精时间可持续5 一7 ，汕1 ，射精过程可分为三个阶段，第一阶段射出少量自色胶状液体，精子较少，可不收集。第二阶段射出的是乳自色、精子浓度高的精液，收集精液。第三阶段射出含精子较少的稀薄精液。当公猪每次射精停止，可按上述办法再次压迫阴茎及摩擦龟头，公猪进行第二次、第三次射精，直至精液射完为止(图5 一4 )。
 

　　( 2 )假阴道法：采用仿母猪阴道条件的人工假阴道，诱导公猪在其中射精而获取公猪精液的方法。科学养猪大全
 

　　假阴道的准备：假阴道由外壳、内胎、集精杯(瓶)、活塞(气嘴)、固定胶圈等部件构成假阴道经正确安装后，通过注水、消毒、涂抹润滑剂、调压、测温等调试，具有适宜的温度、适当的压力和一定的润滑度猪的假阴道长度为35- 38 ( fl11 ，内径为7 一8 。n ，。使用前先将内胎和集精杯彻底洗净，然后安装内胎，消毒、冲洗，用漏斗从装气嘴的入水孔注人假阴道容积2 / 3 的温水并保持其温度(38-40 ℃)，同时借助注水和空气调竹假阴道的压力，通过气嘴送气，使内胎壁日微呈二角的Y 形为止在假阴道内胎从里向外长2/ 3 处涂上均匀的消毒过的润滑hlJ液体石蜡和黄凡士林。
 

　　采精：采精时，采精员站在假母猪的右后侧，当公猪爬跨假母猪时将假阴道与公猪阴茎伸{日方向成一直线，紧靠在假母猪臀部右后侧，迅速将阴茎导人假阴道内，让阴茎在假阴道内抽动而射精射精时将假阴道由集精杯一端向下倾斜，以使精液流人集精杯内公猪射精完毕从假母猪上滑下，假阴道随着公猪阴茎后移，同时将假阴道空气排出，阴茎自行软缩而退出假阴道。
 

　　利用假阴道采精的注意事项：
 

　　①公猪射精只有在阴茎龟头被假阴道夹住，才能使公猪安静。
 

　　②假阴道要有压力，并目_通过双连球有节奏地调节压力，以增加公猪的快感。
 

　　③公猪射精时间长达5 一7 , llirl , 要调节假阴道的角度，防止精液倒流
 

　　(二)精液品质检查
 

　　精液品质检查的目的是了解公猪精子品质的优劣，可以作为精液稀释、保存和利用运输的依据，确定其配种负担能力，同时是对公猪饲养水平的检验，也是对公猪生殖器官功能和采精操作技术质量的判定.
 

　　1 .精液外观性状检查要通过肉眼观察精液的色泽、浑浊度和计量精液量。
 

　　( l )采精量：猪的精液应经过4 一6 层的消毒纱布或离心处理，除去胶状物质后再计量。公猪的精液量平均为2501111，范围为150 一500Inl 。
 

　　( 2 )色泽：止常猪精液为淡白或浅灰白色，精液乳白程度越高，精子越多。如色泽异常，说明生殖器官有疾病精液为淡绿色是混有脓液，淡红色精液是混有血液，精液呈淡黄色是混有尿液。颜色异常的精液应废弃，立即停止采精，查明原因，及时治疗。
 

　　( 3 )气味：正常精液略带有腥味，气味异常的常伴有颜色的变化。有异味的精液不能用于输精，应及时淘汰。
 

　　( 4 )浑浊度(云雾状)：由于精子运动翻腾滚滚如云雾状，精液浑浊度越大，云雾状越显著，呈乳自色，精子密度和活率越高。因此，根据精液浑浊度可估测精子密度和活率高低。
 

　　2 .精子活力检查精子活力又称活率，是指精液中作直线运动的精子占整个精子数的百分比。
 

　　( l )检查方法：检查精子活力需借助显微镜，放大200 -400 倍，把精液样品放在镜前观察。
 

　　①平板压片取1 滴猪原精液或稀释后保存精液于载玻片上，盖上盖玻片，放在镜下观察。
 

　　②悬滴法在盖片仁放1 滴精液，然后将盖片反过来盖于载玻片的凹窝中，即制成悬滴玻片。放在37 - 38 ℃显微镜恒温台或保温箱内，400 倍下观察。低温保存的精液须先升温，并经1 , 5 一Zh 的轻微振荡充氧才能恢复活动并进行制片观察〔观察直线前进运动精子的百分率、精子运动速度和形态。
 

　　( 2 )评定：评定精子活力多采用O 一1 .0 的10 级评分标准，当直线前进运动精子占视野精子的100 % ，精子活力为1 . 0 ;如有80 %的精子作直线前进运动，精子活力为0 . 8 ;如有50 %的精子作直线前进运动，精子活力为0 . 5 ，以此类推。为保证较高的受精率，猪新鲜精液活力一般为0 . 7 一0 . 8 ，液态保存精液一般在0 . 6 以L ，冷冻保存精液在0 . 3 以上，方可输精。
 

　　3 .精子密度的检查精子密度是指单位体积(1 . nl )的精液中含有的精子数二该项指标为精液品质评定的重要指标，精子密度大，稀释倍数高，可增加可配母猪数：测定精子密度的方法有估测法、血球计数法和光电比色计测定法等。
 

　　( 1 )估测法：本法常与检查精子活力同时进行，根据显微镜下精子的稠密和稀疏程度，划分为稠密、中等、稀薄二个等级。猪精子密度一般较稀，平均每毫升为1 亿一2 亿个精子，所以每毫升精液中精子数在3 亿以上的为密，2 亿左右为中等，1 亿左右为稀。
 

　　( 2 )血细胞计数法：采用白细胞计数法定期对公猪的精液进行检查，可准确地测定单位体积精液中的精子数。
 

　　操作方法：先用白细胞管吸取精液至0 . 5 刻度处(稀释20 倍)或1 . 0 刻度处(稀释10 倍)，再吸取3 % NaCI 溶液至吸管的11 刻度处，用拇指和食指分别按住管的两头摇匀，弃去管尖端的精液2 一3 滴，然后慢慢地沿计算板与盖片边缘间隙让其自流少许，以溢满0 . 1 nll 的计算室为准，不能有气泡。先用低倍镜找到400 个小格组成的25 个中方格的计数室，面积为1 , nlll ，。再用高倍镜找中方格，计算四角及中间共5 个中方格中的精子数;每个中方格由16 个小方格组成。压在中方格线_仁精子计上不计下，计左不计右。
 

　　每毫升精液中所含有精子数=5个中方格精子数Kl ( )( ) ( ) ( ) ( ) 0
 

　　( 3 )光电比色计一测定法：首先将原精液稀释为不同比例，并用血球计数法计算其精子密度，制成标准管，用光电比色计测定其透光度，根据不同精子密度标准管的透光度，求出每相差1 %透光度的级差精子数，制成精子查数表测定精液试样时，将原精液按一定比例稀释，根据其透光度查精子查数表，即得精液试样的精子密度。
 

　　4 .精子形态精子形态与受精率密切相关，精液中如含有大量畸形精子和顶体异常精子，其受精力会大大降低。为了保证受胎率，必须检查精子的形态结构，正常的精子形态
 

　　正常精子的形态
 

　　图5 一5 正常精子的形态科学养猪大全
 

　　精子畸形一般分为4 类：①头部畸形，如头部巨大、瘦小、圆形、轮廓不明显、皱缩、缺损、双头等;②颈部畸形，如颈部膨大、纤细、曲折、不全，带有原生质滴、双颈等;③尾部畸形，如弯曲、曲折、回旋、短小、缺损、双尾等;④顷体异常，如顶体不完全、异形等。正常精液中的畸形精子率不超过18 %。
 

　　检查方法：取少量精液迅速做成抹片，用红(蓝)墨水染色3 , llin , 水洗干燥后，在600 倍以仁显微镜下观察。检查总精子数不少与200 个，并计算出畸形精子百分率。
 

　　5 .其他检查
 

　　( 1 )精子存活时间和存活指数检查：精子存活时间是指精子在体外的总生存时间，检杏时将精液置于O ℃或37 ℃下，每隔Zh 进行一次观察，并记录该时间的精子活率，直至无活动精子为止，所需的总小时数为存活时间;存活指数是指相近两次检查的平均活率与间隔时间的积相加总和，精子存活时间越长，指数越大，说明精子生活力强，品质好。
 

　　( 2 ) pH ：猪的新鲜精液pH 为7 . 4 一7 . 5 , pH 偏低的精液品质较好，偏高则受精力、生活力和保存效果显著降低。用万能试纸比色或用电动比色计测定。
 

　　( 3 )亚甲藏褪色试验：亚甲蓝是一种氧化还原指示剂，氧化时呈蓝色，被还原时无色。精子在亚甲蓝溶液中，由于精子去氢酶在呼吸时氧化脱氢，亚甲蓝获氢离子后便使蓝色还原为无色。根据亚甲蓝褪色时间测知精液中存活精子数量的多少，判定精子的活率和密度的高低。
 

　　检查方法：用精液4 份与0 . 02 %亚甲蓝溶液l 份混合，装人1 。111 试管内，以石蜡封口，放在25 ? 40 ℃的温度下观察褪色时问。
 

　　( 4 )精液果糖分解测定：精液果糖分解能力与精子活力密切相关，因此本项测定可作为精子活力评定指标通常用l 亿精子在37 ℃厌氧条件下旬小时消耗果糖的毫克数表示r 、
 

　　检查力一法：在厌氧情况下把一定量的精液(如0 . 5 nll )置于37 ℃的恒温箱中3 11 ，每隔lh 取出0 . 1 间精液样本进行果糖测定，将结果与放人恒温箱前比较，最后计算出果糖分解系数
 

　　(三)精液的稀释和保存
 

　　1 .精液的稀释精液稀释是指在精液中加入适宜精子存活并保持受精能力的稀释液作用是可扩大精液量，增加受配母猪头数;降低精液能量消耗，延长精子在体外的存活时间;便于精子的保存和运输
 

　　( l )稀释液的主要成分和作用
 

　　①稀释剂：主要用来扩大精液容量，要求所选用的稀释剂必须与精液具有相同的渗透压二一般用来单纯扩大精液量的物质有等渗的氯化钠、葡萄糖、蔗糖等二。
 

　　②营养剂：主要是补充精子外源性营养和能源，延长精子寿命，如葡萄糖、果糖、蔗糖、卵黄、奶类等。
 

　　③保护剂：a .缓冲物质：精子在体外不断进行代谢，随着代谢产物(乳酸和C02 等)的累积，精液的pH 会逐渐下降，甚至发生酸中毒，使精子不可逆地失去活力。因此，向精液中加人一定量缓冲物质，以平衡酸碱度。常用的缓冲剂有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾等。
 

　　1 ) . 1 卜电解物质：改变和中和副性腺分泌物的电离程度，以防止精子凝集和补充精子能源，如各种糖类、氨基己酸等。C .防冷物质：在精液保存过程中，常进行降温处理，如温度发生急剧变化，会使精子遭受冷休克而失去活力。0 一10 ℃可使精子内部的缩醛磷脂凝集冻结致精子发生不可逆的蛋白质变性死亡。加人卵黄和奶类，可防止和减轻精子冷休克的发生。d .抗冻物质：在超低温冷冻和解冻处理中，精液的水分结冰和冰晶对精子存活构成致命威胁。加人甘油、二甲基亚枫等抗冻剂，可减轻或免除其危害。e .抗菌物质：具有抗菌作用，防止有害微生物的繁殖。在稀释液中加人青霉素、链霉素、氨苯磺胺等，可延长精子寿命和提高受胎率。
 

　　④其他添加剂：主要用于改善精子外环境的理化特性，以及母猪生殖道的生理机能，有利于提高受精机会，促进合子发育。a .激素类如催产素、前列腺素E等，能促进母猪子宫和输卵管的蠕动，有利于精子运行，提高受胎率。
 

　　l 〕.维生索类如维生素B ，、维生素B3 、维生素B , ：、维生素C 、维生素E 等具有改善精子活力，提高受胎率的作用。〔：. 酶类如过氧化氢酶分解精子代谢中产/l 二的过氧化氢，提高精子活力;p一淀粉酶可促进精子获能：
 

　　( 2 )稀释液的种类和配制
 

　　①稀释液的种类：
 

　　a .现用稀释液：适用于采集后稀释并立即输精用，这类稀释液配方以简单而等渗透压的糖类或奶类为主体，不能保存。b .常温(巧一20 ℃)保存稀释液：适用于精液常温短期保存用。以糖类和弱酸盐为主体，稀释液的pH 较低且含有较低的抗生素(表3一4 )。( ：低温(O 一5 ℃)保存稀释液：适用于精液低温保存用。稀释液中以卵黄或奶类为主体，可抗休克(表3 一5 )。
 

　　表3 一4 猪精液常温保存稀释液
 

　　猪精液常温保存稀释液
 

　　②稀释液配制的注意事项：a .配制稀释液的器具，用前必须洗净并严格消毒，用稀释液冲洗后才能使用。b .稀释液要现配现用，所用蒸馏水或离子水要求新鲜，pH 呈中性。.所用药品成分要纯净，称量准确，经溶解、过滤、消毒后方能使用。
 

　　1 .卵黄要取自新鲜鸡蛋，先将外壳洗净消毒，破壳后用吸管吸取纯净卵黄在室温下加人稀释液，充分混合使用e .使用奶类要新鲜.鲜奶要过滤后在水浴灭菌( 90-95 ℃)lo , 11111 ，去奶皮后方可使用L 添加抗生素、酶类、激索和维生素等，必须在稀释液冷却至室温条件下，按用量准确加人
 

　　( 3 )精液稀释方法和稀释倍数
 

　　①稀释方法：精液稀释应在采精后立即进行迅速把精液置于30 ℃的保温瓶中，以防温度的变化。稀释时将精液和稀释液同时放在30 ℃的水浴锅内，稀释时把稀释液沿着精液容器的壁慢慢加入精液中，边加人边搅拌。如需高倍稀释，应先做3 一5 倍的低倍稀释，然后再高倍，预防精子环境突然改变，造成稀释打击。
 

　　②稀释倍数：精液的稀释倍数过大，对精子存活不利并且严重影响受胎率;稀释倍数过小，不能充分利用精液精液稀释倍数的确定应依据母猪每次受精所需的有效精子数、稀释液的种类等公猪的精液一般稀释2 一4 倍或按每毫升稀释精液含1 亿活动精子为准进行稀释
 

　　2 .精液保存精液稀释后即可进行保存，经保存可延长精子的存活时问，扩大精液的使用范围，同时便一长途运输二常用的精液保存方法有二种，即常温保存、低温保存和冷冻保存。前两种为0 ℃以上的液态短期保存，故称液态保存;后者为冻结长期保存，故称冷冻保存〕
 

　　( l )常温保存(15一25 ℃)：主要是利用一定范围的酸性环境抑制精子的活动，减少能量消耗，使精子保持在可逆的静止状态而不丧失受精能力，通常把pH 调整到6 . 35 左右二
 

　　( 2 )低温保存(o 一5 ℃)：是在抗冷制剂的保护下，防止精子冷体克，缓慢降温到O 一5 ℃保存，从30 ℃降至O 一5 ℃，每分钟降0 . 2 ℃为好用一Zh 完成降温过程利用低温降低精子代谢和能量消耗，抑制微生物生长，同时加人必要营养和其他成分，并隔绝空气，达到延长精子存活的目的。
 

　　( 3 )冷冻保存(一196 ～一79 ℃)：利用液氮(一196 ℃)、干冰(一79 ℃)作冷源，将精液经过特殊处理，保存在超低温下，达到长期保存。精子在超低温下，其代谢几乎停止，以生命相对静止状态保存下来，当温度回升后，又能复苏且其有受精能力。
 

　　(四)输精
 

　　输精是人工授精的最后一个环节，也是最重要的技术之一。能否及时、准确地把精液输送到母猪生殖道的适当部位，是保证受胎的关键。输精前应做好各方面的准备，确保输精的正常实施。
 

　　1 .输精前的准备
 

　　( l )母猪的准备：母猪经发情鉴定后，确定已到输精时间，将其牵人保定栏内保定，尾拉向一侧，阴门及其附近用温肥皂水擦洗于净，再用消毒液消毒，最后用温水或生理盐水冲洗擦干。
 

　　( 2 )器械的准备：输精器械经清洗消毒后，再用稀释液冲洗才能使用。每头母猪准备一个输精管。
 

　　( 3 )精液的准备：新鲜精液经稀释后进行品质检查，符合标准方可使用;常温和低温保存精液需轻轻振荡后升温至35 ℃，镜检精子活力不低于0 . 6 ;冷冻精液经解冻后精子活力不低干0 . 3 方可使用
 

　　2 .输精时间母猪发情后24 - 30 11 开始排卵，排出的卵子在输卵管内保持受精能力的时间为8 一12h ，交配后的精子到达输精管上端需要2 一51 : ，精子在母猪生殖道内保持受精能力的时间为25 - 30h 。输精时问应在排卵之前6h 为宜。在实际工作中常用发情鉴定来判定适宜输精时间二母猪在发情高潮过后的稳定时期，接受压背试验时，或从发情开始后第二天输精为宜。根据老母猪发情期短，年轻母猪略长的情况，宜“老配早.小配晚，不老不小配中间”C
 

　　3 .输精方法先在输精管涂以少许稀释液使之润滑，一手把阴唇分开，把输精管插入阴道，略向上推进，然后平直地慢慢推进，边旋转输精管边插人，经抽送2 一3 次，直至不能前进为止，初产母猪进深为15 一20 ： 11 , ，经产母猪为25 一30 、：1 ，借助压力或推力缓慢注入精液，当有阻力或精液倒流，可将输精管抽送、旋转再注人精液。一般输精日」间为3 一51 币，1 ，输精完毕，缓慢抽出输精管，并用手掌按压母猪腰荐结合部，防止精液倒流。为提高猪的繁殖率，间隔8 一1 Zh 后再输精一次：4 .输精量和精子数每妥母猪每次输精量为20-40 . Tll 有扮精子数达20 亿一30 亿个以卜，可以保证良好的受胎率。
 

　　(五)人工授精实验室常用设备
 

　　建立一个猪的人工授精实验室需要如下基本设备和用具(表3 一7 )。表3 一7 人工授精实验室常用的设备和用具品名设备：