涂尾龙(上海农业科学院)

　　尊敬的各位领导、专家、同行，大家好!非常感谢组委会给我这么一个和大家交流学习的机会。接下来，我将介绍下我们上海市农业科学院畜牧兽医研究所猪育种课题组在无应激皮特兰猪选育及杂交利用方面的工作。

　　皮特兰猪原产于比利时布拉邦特地区，是先由比利时的本地猪与法国的贝衣猪杂交，后又引入英国的泰姆沃斯猪的血统杂交而成，1955年被欧洲各国所公认，是近十几年来欧洲较为流行的猪种。

　　皮特兰猪后躯和背部肌肉丰满，是目前瘦肉率最高的猪种，可达70 %以上，在我国主要是被用作二元或三元杂交生产的父本，以提高杂交商品猪的瘦肉率水平。

　　虽然皮特兰猪具有极高的瘦肉率，但在国内并未能大面积推广，主要原因是其存在比较严重的应激反应，也就是该猪常常在运输途中突然死亡或出现PSE肉(即灰白、松软、渗出液汁)，从而导致生产上的巨大损失。

　　我国每年生猪出栏数超过6亿头，由于应激综合症引起的死亡和PSE猪肉，每年损失巨大。据研究，绝大部分外种猪具有较高频率的氟烷敏感隐性基因，尤其是皮特兰猪。

　　现代生物学研究表明，导致应激发生的是位于猪第6号染色体上p11-q21区域的氟烷基因。目前已知氟烷基因存有三种基因型：NN、Nn、nn，前两种基因型对氟烷气体不敏感。

　　1988年上海市农业科学院畜牧兽医研究所成为国内首次从法国引进皮特兰猪的单位。

　　国内首次针对氟烷基因展开皮特兰猪的分子育种，将PCR-RFLPs的检测结果作为群体选育的主要依据。采用分子选育与常规育种相结合的方法，对获得的无应激皮特兰猪开展群体继代选育。

　　图1 无应激皮特兰猪选育的技术思路与方案

　　技术思路与方案(图1)：

　　第一阶段，无应激皮特兰猪选育群建立。

　　首先，在皮特兰猪群中搜寻或导入或引进N基因。其次，围绕获得的具N基因的皮特兰猪进行扩繁，扩大群体中N基因的频率，选留具NN基因型的皮特兰猪，构建无应激皮特兰猪选育群。

　　第二阶段，对选育群开展群体继代选育。

　　选育过程采用分子选择与常规育种相结合，确保每个世代中群体中n基因的准确检测与选择剔除。开展性能测定并进行选择，提升生产性能，多个世代后，选育出无应激皮特兰猪。其中，针对市场优质肉生产的需要，彻底剔除n基因，开展具NN基因型的优质、高瘦肉率无应激皮特兰猪新品系选育;针对生猪高效养殖的需要，剔除n基因至低水平的频率，彻底剔除nn基因型。

　　第三阶段，杂交与配套组合的选择与利用。

　　以选育出的无应激皮特兰猪为核心，开展与不同生产用种猪的杂交试验，包括地方猪、培育猪及洋种猪，进行配合力的测定，据此进行配套组合的选择，找到最优杂交配套组合。

　　经PCR扩增，其片段长度为118 bp，经HhaI酶切后，显性纯合体(NN，阴性)产生85bp和33 bp两个片段;隐性纯合体(nn，阳性)不能切开，只有一条118bp的片段;杂合体(Nn)则产生118 bp、85 bp 和33 bp三个片段。

　　从2003年11月开始，从图2中可以看出，在2003年11月～2004年3月之间，NN基因型在有的生产批次间还会出现空白，但就整体的一个趋势而言，NN基因型的数量呈上升趋势，而nn基因型在开始时数量较多，经过不断的基因检测，剔除nn基因型，检测结果显示其数量不断降低，进入2006年皮特兰群体内基本上不再出现nn基因型个体。

　　图2 各批次氟烷基因检测结果

　　NN基因型从第1～9批检测时间段内，其频率在10 %左右浮动，平均为5.88 %，Nn基因型则为52.60 %，nn基因型为41.52 %。从第10批开始NN基因型频率逐渐升高，一直到第17批频率升高到1，以后几个批次虽然有升降，但始终维持在较高频率。从第17～28批一共有12批，其NN基因型频率平均为89.54 %，而Nn基因频率则从第17批降为0，接下来的几个批次虽有反弹，但均维持在较低频率，平均为10.08 %，nn基因型从第17批次降为0后，除了第23批次外，其余均为0。这说明经过多个世代有选择性地剔除n基因以及完全淘汰nn基因型的猪，在选育群体中基本上已经没有nn基因型皮特兰猪了。

　　氟烷基因在皮特兰群体中与背膘EBV极显著相关，与肢蹄评分、日增重、母系指数、父系指数等表型显著相关，与其他性状不相关。其中，NN个体在日增重方面表现出明显的优势，在背膘EBV、父系指数及母系指数中Nn个体表现较好，但是nn个体在肢蹄方面表现好于其他两种基因型。

　　三种基因型的猪的胴体瘦肉率分别为：NN的70.18 %，Nn的72.08 %，nn的76.74 %，呈现NN

　　杂交组合试验结果表明，在其他饲养条件基本相同时，肥育试验为119 d时，(皮·杜)×申组合(I)和(杜·皮)×申组合平均日增重(g/d)基本相当，分别为569.07、569.81，差异不显著;而(皮·杜)×申组合(I)高于皮×申组合52 g左右，差异不显著;肥育时间均为135 d时，(皮·杜)×申组合(II)高于杜×申组合52 g左右，差异不显著。此阶段的结果表明，在同等条件下，(皮·杜)×申和(杜·皮)×申组合分别优于皮×申组合和杜×申组合，充分显示了杂交公猪的优势。