猪寄生虫病诊断方法
 

　　(一)粪便虫卵检查法
 

　　1.直接涂片检查法 是简便和常用的方法，但检查时所用的粪便数量少，故检出率较低。本法是先在载玻片上滴一滴甘油与水的混合液，再用牙签或火柴棍挑起少量粪便加入其中，混匀，夹去较大的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于书上，能通过粪便液膜模糊地看出其下的字为合适。在粪便上覆以盖玻片，置显微镜下检查。检查时应顺序地查遍盖玻片下所有部分。
 

　　2.水洗沉淀法 取粪便5克，加清水100毫升以上，搅匀成粪液，通过40~60目铜筛过滤，滤液收集于烧杯中，静置沉淀20分钟，倾去上清液，保留沉渣，再加清水混匀，再沉淀，如此反复操作直到上层液体透明后，吸取沉渣检查。
 

　　3.漂浮法 先往青霉素空瓶中加入适量饱和盐水，再往瓶内加入粪便1克，混匀，筛滤，滤液注入另一瓶中，补加饱和盐水溶液使瓶口充满，上覆以盖玻片，并使液面与盖玻片接触，其间不留气泡，直立20分钟后，取下盖玻片检查。此法适用于检查比重比饱盐水溶液轻的虫卵，如一般线虫卵和球虫卵囊等。
 

　　(二)常见虫卵的一般特征
 

　　1.猪蛔虫卵 虫卵短椭圆，棕黄色，大小为56~87微米×46~57微米，壳厚，外表有凹凸不平的蛋白质膜，刚排出的虫卵含一未分裂的卵黄细胞，未受精卵呈现长椭圆形，壳较薄。
 

　　2.结节线虫卵 椭圆形，淡灰色，卵壳薄而光滑，内含8~16个球形的胚细胞。大小为45~55微米×26~36微米。
 

　　3.猪鞭虫卵 呈淡褐色，具有厚而光滑的外膜，两极呈栓塞状，形如腰臌，内有一胚细胞。虫卵大小为52~61微米×27~30微米。
 

　　4.兰氏类圆线虫卵 呈椭圆形，淡灰色，卵壳薄而光滑，卵内含有成形的幼虫，幼虫呈U字形。大小为45~55微米×26~30微米。
 

　　5.布氏姜片虫卵 呈淡黄色，卵壳薄，其一端有不明显的卵盖，卵黄均匀地散布于卵壳内。大小为130~140微米×80~85微米。
 

　　6.球虫卵囊 呈卵园或椭圆形，淡灰色，壳薄而光滑，内有颗粒状的原生质团块。其大小因种类不同而不同，大的为24.6~31.9微米×23.2~24.0微米，小的为11.2~16.0微米×9.6~12.8微米。
 

　　(三)猪疥螨的实验室检查方法
 

　　1.病料的采取
 

　　疥螨寄生于猪的皮内，因此应刮取皮屑，置于显微镜下，寻找虫体。刮取皮屑的方法很重要，应选择患病皮肤与健康皮肤交界处，这里的螨较多，往往在耳壳内容易寻找。先在要刮取的皮肤处滴加少许50%的甘油水溶液，然后用将边缘磨锐的不锈钢小勺耒刮取皮屑，直到皮肤轻微出血。将刮下的皮屑置入试管或塑料袋内，带回供检查。
 

　　2.检查方法
 

　　(1)显微镜下直接检查法 将刮下的皮屑置载玻片上，加入少量50%甘油水溶液，覆以另一张载玻片。搓压载玻片使病料散开，分开载玻片，置显微镜下检查。此法适合于检查皮屑中虫体较多的病料。
 

　　(2)虫体浓集法 为了在较多的病料中，检出其中较少的虫体，提高检出率，可采用浓集法。此法先取较多的病料，置于试管中，加入10%NaOH溶液，在洒精灯上煮沸数分钟，使皮屑溶解，虫体自皮屑中分离出来。然后其自然沉淀或以每分钟2 000转/分钟的速度离心20分钟，吸取沉渣镜检。
 

　　(四)猪附红细胞体的实验室检查方法
 

　　可用来作为诊断的最重要的临床症状是：贫血，对外界反应迟钝，发热高达40℃或更高。其它示病症状是：耳廓边缘变色，皮肤变态反应。
 

　　查找病原是确认该病的主要方法，新鲜血液加等量生理盐水稀释后置显微镜下观察，可见虫体呈球形，逗点形，杆状或颗粒状。由于虫体附着在红细胞表面有张力作用，红细胞在视野内上下震动或左右运动，红细胞形态也发生了变化，呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。血液姬姆萨染色后，虫体可染成紫红色，但该种染色方法的缺点是姬姆萨色素沉着，容易形成假像。血清经吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体。但这一技术的复杂性使其只适宜实验室诊断。该染色情况下，附红细胞体呈浅至深桔黄色。
 

　　血清诊断方法包括IHA试验、补体结合试验或ELISA方法，但抗体的产生与病原数量的增多(而不是与感染发生的时间)有暂时的相关性。这意味着抗体的产生呈波浪形。即使数次急性发作后，抗体滴度也只能在2-3个月内维持较高水平，之后便会下降到阈值以下，这表明假阴性是常见的。所有血清学方法只适合于群体诊断。
 

　　PCR诊断已经成功地用于猪附红细胞体病。不过，该方法不能区别带虫猪和发病猪。
 

　　动物试验也是确认猪附红细胞体病的方法之一。常用的试验动物是小白鼠，用小猪作试验动物时则需摘除脾脏。怀疑为猪附红细胞体病的猪在切除脾脏后观察3-20天，若是带虫猪则会出现急性附红细胞体的症状，此时可通过查找血涂片中的虫体进行
 

　　猪寄生虫病诊断
 

　　猪附红细胞体病的诊断方法
 

　　猪附红细胞体病的诊断方法主要有以下几种：
 

　　1、悬滴法
 

　　新鲜血液加等量生理盐水稀释后吸取数滴置载玻片上，加盖盖玻片，置显微镜下观察，可见虫体呈球形，逗点形，杆状或颗粒状。由于虫体附着在红细胞表面有张力作用，红细胞在视野内上下震动或左右运动，红细胞形态也发生了变化，呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。
 

　　该方法也适用于抗凝血液。抗凝血液存放1-2天一般并不影响检测结果。
 

　　2、直接涂片法
 

　　取新鲜或抗凝血少许置载玻片上推成薄层，然后在显微镜下直接观察。可看到附红细胞体呈球形，逗点形，杆状或颗粒状。寄生有附红细胞体的红细胞呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。该方法的优点是简单、快速。不足之处一是对推片的技术有一定要求，红细胞必需推成薄层;二是容易和其他导致红细胞变形的情况混淆。
 

　　3、染色检查
 

　　血液涂片经姬姆萨染色后，虫体可染成紫红色，但该种染色方法的缺点是姬姆萨色素沉着，容易形成假像。血清经吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体。但这一技术的复杂性使其只适宜实验室诊断。该染色情况下，附红细胞体呈浅至深桔黄色。
 

　　4、血清学诊断
 

　　包括IHA试验、补体结合试验或ELISA方法，但抗体的产生与病原数量的增多(而不是与感染发生的时间)有暂时的相关性。这意味着抗体的产生呈波浪形。即使数次急性发作后，抗体滴度也只能在2-3个月内维持较高水平，之后便会下降到阈值以下，这表明假阴性是常见的。所有血清学方法只适合于群体诊断。
 

　　5、PCR诊断
 

　　国外已有PCR技术用于猪附红细胞体病诊断的报道。不过，该方法不能区分带虫猪和发病猪。
 

　　6、动物试验
 

　　常用的试验动物是小白鼠，用小猪作试验动物时则需摘除脾脏。怀疑为猪附红细胞体病的猪在切除脾脏后观察3-20天，若是带虫猪则会出现急性附红细胞体的症状，此时可通过查找血涂片中的虫体进行诊断。