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猪轮状病毒病的诊断

来源:中国养猪网 2010-10-20 14:40:03| 查看:

猪轮状病毒病的诊断[/page] 

一)临床综合诊断

本病发生于寒冷季节,多侵害幼龄动物。突然发生水样腹泻,发病率高而病死率一般较低,主要病变一般在小肠,根据这些特点,可以作出初步诊断。但是,轮状病毒病要与猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和仔猪黄痢、白痢区别,因此进行实验室检查是必要的。

二)实验室诊断

1.病原学检查

(j)电镜检查:是常用的诊断法。将粪便提取液经超速离心浓缩,沉淀物用磷钨酸负染直接观察。直接电镜法检查粪样中的病毒粒子时,要求粪样中含108 /mL病毒粒子才可获得阳性结果。因此,应收集发病初期的腹泻粪样,其含毒量较高,易于检出。

(2)病毒分离:可用MA-104CV-IST等传代细胞或猪、牛肾原代细胞等分离病毒。若粪便标本先用胰蛋白酶处理( 10-20tcg/mL),可提高病毒的分离率。若仍不能适应细胞培养,则可将粪样抽提浓缩后感染剥夺初乳的同源动物1-2代,以提高适应细胞培养的成功率。

(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳法:是目前较常用的方法。利用轮状病毒基因组分为1 1个片段的特征,直接从待检粪样重提取病毒核酸,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAE),硝酸银染色,观察其特征性图谱。此法尚可区分人和动物的轮状病毒。

此外,反向间接血凝法、乳胶凝集试验、免疫荧光法等亦常应用。

随着分子生物学新方法的不断涌现,核酸探针杂交技术、

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