临床综合诊断
本病多发生于寒冷季节,不同年龄的猪相继或同时发病,表现水样腹泻和呕吐,10日龄猪病死率很高,较大的或成年猪经5—7d康复,病死仔猪小肠呈卡他性炎症变化,肠绒毛萎缩、现地兽医技术人员可据此做出初步诊断,尽快采取控制措施。
病原学诊断
1.人工感染乳猪试验 将病猪小肠组织及肠内容物制成悬液,2 000r/min离心取上清经口接种2-3日龄健康乳猪,如果经12-48h出现典型症状,即可结合流行病学予以诊断,但仍不能排除其他病毒的可能。再结合荧荧光抗体法可确诊。
2.细胞培养分离鉴定病毒 将小肠组织及内容物制成悬液,过滤除菌后,接种敏感细胞,如ST细胞,观察细胞病变。一般需经盲传多代方可见细胞病变。进一步鉴定病毒,可用荧光抗体法和RT-PCR检查细胞培养物。
3.直接荧光抗体法 将感染猪的空肠制成冰冻切片,或刮取空肠绒毛上皮细胞制成抹片,丙酮4℃固定30min,而后滴加TGEV特异性荧光抗体,置于湿盒,37℃孵育30min,再用